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分光光度計法測農藥殘留的優點
时间:2019-03-06 点击次数:3150

農藥殘留的檢測在紫外可見分光光度計、分光光度計檢測方面,已經取得了很大進步,紫外可見分光光度計灵敏度的提高,稳定性的提高给予农药残留的检测能力、检测限、覆盖范围等带来了非常大的提升。(如双光束紫外可見分光光度計UV1901PC)具备双光束光学系统,参比和样品可同时放入,提高了分析效率和准确性。有利于加强农药残留监控力度。同时UV1901PC双光束紫外可見分光光度計具备单机扫描(随开机,随扫描),自动绘制标准曲线(一种残留元素,只需做一次标准曲线,可储存于紫外可見分光光度計本机中,使用时调出。方便实用),单机多波长(一个样品同时测出不同波长的数值。减少实验时间和操作步驟),动力学等功能(观察样品时间上的变化,可长达10个小时)。

 本方法適用于蔬菜、水果、相應食物、水及中毒殘留物中有機類和氨基甲酸酯類農藥殘留的檢測。

一定條件中,氨基甲酸酯類農藥、有機磷對膽堿酯酶有抑制作用,抑制率與農藥的濃度呈正比。用分光光度計測農殘的方法其實是利用酶催化乙酰膽堿水解産物與顯色劑生成黃色物質,其物質在紫外412nm波長處有吸收,可以利用紫外可見分光光度計测定其吸光度随时间的变化值(使用UV1901PC紫外可見分光光度計动力学功能操作简便)得出蔬菜中含有机磷或氨基甲酸酯类农残留量的情况。

 

主要儀器:

分光光度計/紫外可見分光光度計,電子天平,移液槍及配套管嘴,冰箱,超聲波提取儀/萃取儀/處理器(FS-600N)

試劑

PH8.0缓冲溶液  分别称取11.9g无水磷酸氢二钾和3.2g磷酸二氢钾,溶解于1000ml蒸馏水中。

显色剂    分别称取160mg5,5-二硫代2-(硝基苯甲酸)(DTNB)15.6mg碳酸氢钠,溶解于20ml缓冲溶液中,4℃冰箱中保存。

底物   称取125mg碘化硫代丁酰胆碱,溶解于15ml缓冲液中,摇匀后置4℃冰箱中保存备用。保存期不超过两周。

丁/乙酰胆碱酯酶 根据酶的活性情况,用缓冲液溶解,3min内的吸光度变化控制在0.4~0.8。摇匀后置4℃冰箱中保存备用。

操作步驟

样品处理  选取有代表性的蔬菜样品,冲洗掉表明泥土,剪成1cm左右见方碎片,取样品1g,放入烧杯或提取瓶中,加入5ml缓冲溶液,手摇振荡1~2Min,或超聲波振荡30s,浸出提取液,静置3~5min,待用。

对照溶液测试  先于试管中加入50ul酶液和50ul显色剂,再加入2.5ml缓冲溶液,摇匀后于37℃放置15min,加入50ul底物摇匀,此时开始反应并显色,要立即放入分光光度計/紫外可見分光光度計自動聯樣品池中,記錄反應3min時的吸光度。

样品溶液测试  先于试管中加入50ul酶液和50ul显色剂,再加入2.5mL样品提取液,其他操作与对照溶液测试相同,记录反应3min的吸光度变化值。

分光光度計法測農藥殘留主要優點:穩定性好,靈敏性高。

 

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